液相色譜儀系統
點擊次數:2383 更新時間:2018-03-27
液相色譜儀系統
器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為供的信號,常用器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發(fā)光等。
1.紫外見吸收器
紫外見吸收器(UVD)是HPLC中應用zui的器之一,所有的液相色譜儀配有這種器。其點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對吸收物質限1ng,后不破壞樣品,用于制備,并能與器串聯使用。紫外見器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有活動地的紫外見光度計。
(1)紫外吸收器
紫外吸收器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)出紫外-見區(qū)范圍的連續(xù)波長,并安裝一個光柵型單色器,其波長選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個流通池,一個作參比,一個作丈量用,光源發(fā)出的紫外光照到流通池上,若兩流通池通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下吸收,光電管上接受到的輻度相等,信號輸出。當組分進進丈量池時,吸收的紫外光,使兩光電管接受到的輻度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關。
局限:活動相的選擇受到限制,即具有紫外吸收的溶劑不能做活動相,每種溶劑有截止波長,當小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降10%以下,因此,紫外吸收器的工作波長不能小于溶劑的截止波長
?。?)光電二極管陣列器
也稱掃描紫外見分光器,是一種的光吸收式器。它采用光電二極管陣列作為元件,構成多通道并行工作,同時由光柵分光,再進到陣列式接收器上的波長的光信號,然后對二極管陣列掃描采集數據,得到吸收值(A)是保存時間(tR)和波長(l)函數的三維色譜光譜圖。由此及時觀察與每一組分的色譜圖相應的光譜數據,從而迅速決定具有*選擇性和靈敏度的波長。
2.熒光器(fluorescence detector,FD)
熒光器是一種高靈敏度、有選擇性的器,能產生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質通過化學衍生化天生熒光衍生物,再進行熒光。其zui小濃度0.1ng/ml,適用于痕量分析;一般情況下熒光器的靈敏度比紫外器約高2個數目,但其線性范圍不如紫外器寬。
近年來,采用激光作為熒光器的光源而產生的激光誘導熒光器地增了熒光的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和痕量分析中得到應用。
3.示差折光器
示差折光器是一種濃度型通用器,對所有溶質有響應,某些不能用選擇性器的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,用示差器。示差器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質進進另一種介質時,由于兩種物質的折率不同就會產生折。只要樣品組分與活動相的折光指數不同,就被,二者相差愈大,靈敏度愈高,在濃度范圍內器的輸出與溶質濃度成正比。
4.電化學器
電化學器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導等器,屬選擇性器,具有電活性的化合物。目前它已在各種機和陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農藥及藥等的測定中獲
得了的應用。其中,電導器在離子色譜中應用zui多。
電化學器的優(yōu)點是:
①靈敏度高,zui小檢丈量~般為ng,有目pg;
?、谶x擇性好,測定大量非電活性物質中極痕量的電活性物質;
?、劬€性范圍寬,一般為4~5個數目;
?、茉O備簡單,本錢較低;
⑤易于自動操縱。
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